இரத்தத்தில் வைட்டமின் ஏ

இரத்த சீரத்தில் வைட்டமின் ஏ (ரெட்டினோல்) செறிவுக்கான குறிப்பு மதிப்புகள் (விதிமுறை): 1-6 வயது குழந்தைகளில் - 0.7-1.5 μmol/l, 7-12 வயது - 0.91-1.71 μmol/l, 13-19 வயது - 0.91-2.51 μmol/l; பெரியவர்களில் - 1.05-2.09 μmol/l.

வைட்டமின் ஏ ஒரு கொழுப்பில் கரையக்கூடிய வைட்டமின் மற்றும் இரண்டு வடிவங்களில் உள்ளது: வைட்டமின் ஏ தானே, அல்லது ரெட்டினோல் (விலங்கு பொருட்களில் மட்டுமே காணப்படுகிறது), மற்றும் புரோவைட்டமின் ஏ, கரோட்டின் (விலங்கு மற்றும் தாவர பொருட்களிலிருந்து பெறப்படுகிறது) என அழைக்கப்படுகிறது, இது செரிமான மண்டலத்தின் சுவர்களில் ரெட்டினோலாக மாற்றப்படலாம். உணவு ரெட்டினோலில் தோராயமாக 50-90% சிறுகுடலில் உறிஞ்சப்பட்டு கைலோமிக்ரான்-பிணைக்கப்பட்ட வளாகத்தில் கல்லீரலுக்கு கொண்டு செல்லப்படுகிறது, அங்கு அது ரெட்டினோல் பால்மிடேட்டாக சேமிக்கப்படுகிறது. தேவைப்படும்போது, வைட்டமின் ஏ-பிணைப்பு புரதத்துடன் கூடிய ரெட்டினோலாக இது இரத்த ஓட்டத்தில் வெளியிடப்படுகிறது. இரத்த சீரத்தில், வைட்டமின் ஏ-பிணைப்பு புரதம் + ரெட்டினோல் வளாகம் டிரான்ஸ்தைரெட்டினுடன் பிணைக்கிறது. இரத்த சீரத்திலிருந்து, ரெட்டினோல் விழித்திரை மற்றும் எபிதீலியத்தின் ஒளி ஏற்பிகள் போன்ற இலக்கு செல்களால் எடுத்துக்கொள்ளப்படுகிறது.

உடல் தேவைகளை விட அதிகமான அளவு வைட்டமின் A ஐப் பெறும்போது (வயது, பாலினம் மற்றும் உடலியல் நிலையைப் பொறுத்து ஒரு நாளைக்கு 180-430 mcg ரெட்டினோல்), அதன் அதிகப்படியான அளவு கல்லீரலில் படிந்து, இந்த வைட்டமின் ஒரு கிடங்கை உருவாக்குகிறது. உணவுடன் ரெட்டினோலை உட்கொள்வது குறைக்கப்படும்போது, கல்லீரலில் இருந்து அதன் இருப்புக்கள் இரத்த ஓட்டத்தில் வெளியிடப்படுகின்றன, இரத்த சீரத்தில் ரெட்டினோலின் செறிவை சாதாரண அளவில் (0.7 μmol/l க்கு மேல்) பராமரிக்கின்றன. வைட்டமின் A இன் பிற உயிரியல் ரீதியாக செயல்படும் வடிவங்கள் (ரெட்டினல் மற்றும் ரெட்டினோயிக் அமிலம்) மிகக் குறைந்த செறிவுகளில் (0.35 μmol/l க்குக் கீழே) இரத்தத்தில் உள்ளன; ரெட்டினோல் எஸ்டர்கள் மொத்த வைட்டமின் A இல் (0.1-0.17 μmol/l) தோராயமாக 5% ஆகும்.

வைட்டமின் ஏ ஆக்ஸிஜனேற்ற-குறைப்பு செயல்முறைகளில் முக்கிய பங்கு வகிக்கிறது. ரெட்டினோல் கல்லீரல் மற்றும் தசைகளில் கிளைகோஜன் உருவாவதை ஊக்குவிக்கிறது, இரத்தத்தில் கொழுப்பின் அளவை அதிகரிக்க உதவுகிறது, மேலும் ஸ்டீராய்டு மற்றும் பாலியல் ஹார்மோன்களின் தொகுப்பில் பங்கேற்கிறது. இது எலும்பு அமைப்பு, ரோடாப்சின் மறுஒழுங்கமைப்பின் வளர்ச்சி மற்றும் உருவாக்கத்திற்கு அவசியம், மேலும் சளி சவ்வுகள் மற்றும் தோலின் ஊடாடும் எபிட்டிலியத்தின் இயல்பான செயல்பாட்டை ஊக்குவிக்கிறது, அதன் மெட்டாபிளாசியா, ஹைப்பர்கெராடோசிஸ் மற்றும் அதிகப்படியான மந்தநிலையைத் தடுக்கிறது. வைட்டமின் ஏ முடி, பற்கள் மற்றும் ஈறுகளை வலுப்படுத்த உதவுகிறது. சமீபத்திய ஆண்டுகளில், புற்றுநோயைத் தடுப்பதிலும் நோய் எதிர்ப்பு சக்தியை ஒழுங்குபடுத்துவதிலும் வைட்டமின் ஏ இன் பன்முகத்தன்மை கொண்ட பங்கு காட்டப்பட்டுள்ளது (பாகோசைட்டோசிஸை நிறைவு செய்வதற்கு இது அவசியம், Ig தொகுப்பை அதிகரிக்கிறது, T-கொலையாளிகளின் உருவாக்கத்தைத் தூண்டுகிறது, வகை II T-உதவியாளர்களைத் தூண்டுகிறது, முதலியன). வைட்டமின் ஏ ஒரு செயலில் உள்ள ஆக்ஸிஜனேற்றியாகும், முக்கியமாக வைட்டமின் E முன்னிலையில் செயல்படுகிறது; இது வைட்டமின் சி ஆக்ஸிஜனேற்றத்திலிருந்து பாதுகாக்கிறது. வைட்டமின் ஏ குறைபாடு வீரியம் மிக்க நியோபிளாம்களுக்கு ஆபத்து காரணியாகக் கருதப்படுகிறது. உணவில் வைட்டமின் ஏ அளவை அதிகரிப்பது சராசரி ஆயுட்காலம் 17.5% அதிகரிப்பதாக பரிசோதனை ஆய்வுகள் காட்டுகின்றன. வைட்டமின் ஏ-இணைப்பு புரதத்தின் தொகுப்புக்கு அவசியமான வைட்டமின் ஏ வளர்சிதை மாற்றத்தில் துத்தநாகம் ஒரு அத்தியாவசிய துணை காரணியாகும்.

பெரியவர்களுக்கு (20-50 வயது) ரெட்டினோலின் சராசரி தினசரி தேவை 1.2 மிகி (4000 IU, 1 IU என்பது 0.3 mcg ரெட்டினோலுக்குச் சமம்), கர்ப்பிணிப் பெண்களுக்கு - 1.5 மிகி (5000 IU), தாய்ப்பால் கொடுக்கும் பெண்களுக்கு - 1.8 மிகி (6000 IU), 60 வயதுக்கு மேற்பட்டவர்களுக்கு - 2.5 மிகி (10,000 IU). ரெட்டினோலுக்கான தினசரி தேவையில் குறைந்தது மூன்றில் ஒரு பங்கு முடிக்கப்பட்ட வடிவத்தில் உடலுக்கு வழங்கப்பட வேண்டும்; மீதமுள்ளவை கரோட்டினாய்டுகளை உட்கொள்வதன் மூலம் ஈடுகட்டப்படலாம், அதில் இருந்து ரெட்டினோல் உடலில் உருவாகிறது. உணவுப் பொருட்களில் உள்ள ரெட்டினோலில் தோராயமாக 30% வெப்ப சிகிச்சையின் போது அழிக்கப்படுகிறது என்பதை கணக்கில் எடுத்துக்கொள்ள வேண்டும். ரெட்டினோலின் செயல்பாடு கரோட்டினை விட 2 மடங்கு அதிகமாகும், கூடுதலாக, பிந்தையதில் 30-40% மட்டுமே குடலில் உறிஞ்சப்படுகிறது. எனவே, உணவை மதிப்பிடும்போது, 1 மிகி ரெட்டினோல் தோராயமாக 6 மிகி கரோட்டினாய்டுகளுக்குச் சமம் என்று நம்பப்படுகிறது.

LA அனிசிமோவாவால் மாற்றியமைக்கப்பட்ட பெஸ்ஸியின் கூற்றுப்படி இரத்த சீரத்தில் ரெட்டினோல் (வைட்டமின் ஏ) மற்றும் கரோட்டினாய்டுகளை தீர்மானித்தல்.

முறையின் கொள்கை

வைட்டமின் ஏ மற்றும் கரோட்டினாய்டுகளின் நிர்ணயம், கார ஆல்கஹால் கரைசலில் அவற்றின் நீராற்பகுப்பை அடிப்படையாகக் கொண்டது, அதைத் தொடர்ந்து கரிம கரைப்பான்களின் கலவையுடன் பிரித்தெடுக்கப்படுகிறது.

வினைப்பொருட்கள்

• 11 M பொட்டாசியம் ஹைட்ராக்சைடு (KOH) கரைசல்.
• 96% எத்தில் ஆல்கஹால்.
• 96% எத்தில் ஆல்கஹாலில் 1 M பொட்டாசியம் ஹைட்ராக்சைடு (KOH) கரைசல்: 1 தொகுதி 11 M KOH கரைசல் 10 தொகுதி 96% எத்தில் ஆல்கஹாலுடன் கலக்கப்படுகிறது. ஆய்வு நாளில் வினைப்பொருள் தயாரிக்கப்படுகிறது. கலக்கும் போது நிறம் ஏற்பட்டால், பயன்படுத்துவதற்கு முன்பு ஆல்கஹால் வடிகட்டுதல் மூலம் சுத்திகரிக்கப்பட வேண்டும்.
• சைலீன், வேதியியல் ரீதியாக தூய்மையானது
• ஆக்டேன், வேதியியல் ரீதியாக தூய்மையானது
• சைலீன்-ஆக்டேன் கலவை: சைலீன் மற்றும் ஆக்டேன் ஆகியவற்றை சம அளவுகளில் கலப்பதன் மூலம் தயாரிக்கப்படுகிறது.

ஆய்வுகள் ஒரு நிறமாலை ஒளிமானியைப் பயன்படுத்தி மேற்கொள்ளப்படுகின்றன.

வைட்டமின் ஏ தீர்மானிக்கும் செயல்முறை

விரலில் இருந்து எடுக்கப்பட்ட இரத்தம் (சுமார் 1 மில்லி) ஒரு மையவிலக்கு குழாயில் வைக்கப்பட்டு, வெதுவெதுப்பான நீரில் (வெப்பநிலை 40-45°C) ஒரு கண்ணாடி கோப்பையில் 20-30 நிமிடங்கள் வைக்கப்படுகிறது. சீரம் பிரிக்க, இரத்த உறைவு ஒரு மெல்லிய கண்ணாடி கம்பியால் குழாய் சுவர்களின் விளிம்பில் கவனமாக வரையப்பட்டு, 3000 rpm இல் 10 நிமிடங்களுக்கு மையவிலக்கு செய்யப்படுகிறது.

0.12 மில்லி சீரம் சேகரிக்கப்பட்டு ஒரு திரட்டு குழாய்க்கு மாற்றப்படுகிறது, அங்கு 0.12 மில்லி 1 M பொட்டாசியம் ஹைட்ராக்சைடு ஆல்கஹால் கரைசல் சேர்க்கப்படுகிறது. உள்ளடக்கங்கள் நன்கு அசைக்கப்படுகின்றன.

மாதிரிகளுடன் கூடிய சோதனைக் குழாய்கள் நீராற்பகுப்பை மேற்கொள்ள 60° C வெப்பநிலையில் 20 நிமிடங்கள் நீர் குளியல் ஒன்றில் வைக்கப்படுகின்றன.

மாதிரிகள் குளிர்விக்கப்பட்டு, 0.12 மில்லி சைலீன்-ஆக்டேன் கலவை அவற்றில் சேர்க்கப்பட்டு, 10-15 வினாடிகளுக்கு தீவிரமாக குலுக்கப்பட்டு, மீண்டும் குளிர்விக்கப்பட்டு மையவிலக்கு செய்யப்படுகிறது.

வைட்டமின் ஏ மற்றும் கரோட்டினாய்டுகள் கொண்ட மேல் அடுக்கு, ரப்பர் பல்புடன் கூடிய பாஸ்டர் பைப்பெட்டைப் பயன்படுத்தி கவனமாக அகற்றப்பட்டு, மைக்ரோகுவெட்டுகளுக்குள் மாற்றப்படுகிறது.

வைட்டமின் A ஐ தீர்மானிக்க மாதிரிகள் 328 nm அலைநீளத்திலும், கரோட்டினாய்டுகளை தீர்மானிக்க 460 nm அலைநீளத்திலும் நிறமாலை ஒளி அளவீடு செய்யப்படுகின்றன.

நிறமாலை ஒளி அளவீட்டிற்குப் பிறகு, வைட்டமின் ஏ-ஐ அழிக்க மாதிரிகள் புற ஊதா கதிர்வீச்சுக்கு உட்படுத்தப்படுகின்றன. இதற்காக, நுண்குவெட்டுகளிலிருந்து 15-20 செ.மீ தொலைவில் ஒரு குவார்ட்ஸ் (பாக்டீரியா கொல்லி) விளக்கு நிறுவப்படுகிறது, இதனால் திரவத்தால் நிரப்பப்பட்ட குவெட்டின் பகுதி கதிர்வீச்சுக்கு ஆளாகிறது; கதிர்வீச்சு நேரம் 45-60 நிமிடங்கள் ஆகும்.

மாதிரிகள் 328 nm அலைநீளத்தில் மறு-ஸ்பெக்ட்ரோஃபோட்டோமீட்டர் செய்யப்படுகின்றன. வைட்டமின் A க்காக பெஸ்ஸி கணக்கிட்ட குணகம் (காரணி) 637 ஐ கணக்கில் எடுத்துக்கொண்டு, அழிவு மதிப்புகளில் (ஆப்டிகல் அடர்த்தி) உள்ள வேறுபாட்டால் வைட்டமின் A உள்ளடக்கம் தீர்மானிக்கப்படுகிறது.

கணக்கீடு சூத்திரத்தின்படி மேற்கொள்ளப்படுகிறது:

எக்ஸ் = 637 × (E328(1) - E328(2)),

X என்பது வைட்டமின் A இன் உள்ளடக்கம், μg/dl; 637 என்பது வைட்டமின் A ஐ தீர்மானிக்க பெஸ்ஸியால் கணக்கிடப்பட்ட குணகம்; E328(1) என்பது கதிர்வீச்சுக்கு முன் கரைசலின் ஒளியியல் அடர்த்தி; E328(2) என்பது கதிர்வீச்சுக்குப் பிறகு கரைசலின் ஒளியியல் அடர்த்தி.

வைட்டமின் A செறிவை µg/dL இலிருந்து µmol/L ஆக மாற்றுவதற்கான குணகம் 0.035 ஆகும்.

கரோட்டினாய்டுகளின் உள்ளடக்கம் சூத்திரத்தைப் பயன்படுத்தி கணக்கிடப்படுகிறது:

எக்ஸ் = 480-இ480,

இங்கு X என்பது கரோட்டினாய்டு உள்ளடக்கம், μg/dl; 480 என்பது கரோட்டினாய்டுகளை தீர்மானிப்பதற்காக பெஸ்ஸியால் கணக்கிடப்பட்ட குணகம்; E480 என்பது சோதனை கரைசலின் ஒளியியல் அடர்த்தி ஆகும்.

குறிப்பு

பெஸ்ஸியின் கூற்றுப்படி, ஆராய்ச்சி நடத்தும்போது பெரிய அல்லது சிறிய அளவிலான சீரம் பயன்படுத்தப்படலாம், ஆனால் சைலீன்-ஆக்டேன் கலவையின் அளவு (அளவு) எந்த மாற்றத்திலும் ஆல்கஹால் கரைசலின் அளவிற்கு அதன் விகிதம் நிலையானதாக இருக்க வேண்டும்.

இரத்த சீரத்தில் வைட்டமின் A இன் சாதாரண உள்ளடக்கம்: புதிதாகப் பிறந்த குழந்தைகள் மற்றும் குழந்தைகளில் - 160-270 μg/l; பெரியவர்களில் - 1.05-2.45 μmol/l (300-700 μg/l). பெரியவர்களின் இரத்த சீரத்தில் கரோட்டினாய்டுகளின் உள்ளடக்கம் 800-2300 μg/l ஆகும்.