அனைத்து iLive உள்ளடக்கம் மருத்துவ ரீதியாக மதிப்பாய்வு செய்யப்படும் அல்லது முடிந்தவரை உண்மையான துல்லியத்தை உறுதி செய்ய உண்மையில் சரிபார்க்கப்படுகிறது.
நாம் கடுமையான ஆதார வழிகாட்டுதல்களை கொண்டிருக்கிறோம் மற்றும் மரியாதைக்குரிய ஊடக தளங்கள், கல்வி ஆராய்ச்சி நிறுவனங்கள் மற்றும் சாத்தியமான போதெல்லாம், மருத்துவ ரீதியாக மதிப்பாய்வு செய்யப்பட்ட படிப்புகளை மட்டுமே இணைக்கிறோம். அடைப்புக்களில் உள்ள எண்கள் ([1], [2], முதலியன) இந்த ஆய்வுகள் தொடர்பான கிளிக் செய்யக்கூடியவை என்பதை நினைவில் கொள்க.
எங்கள் உள்ளடக்கத்தில் எதையாவது தவறாக, காலதாமதமாக அல்லது சந்தேகத்திற்குரியதாகக் கருதினால், தயவுசெய்து அதைத் தேர்ந்தெடுத்து Ctrl + Enter ஐ அழுத்தவும்.
பரம்பரை நோய்களைக் கண்டறிவதற்கான மூலக்கூறு மரபணு முறைகள்
கட்டுரை மருத்துவ நிபுணர்
கடைசியாக மதிப்பாய்வு செய்யப்பட்டது: 06.07.2025
ஒரு குறிப்பிட்ட குரோமோசோமில் ஒரு பிறழ்ந்த மரபணுவின் உள்ளூர்மயமாக்கலைத் தீர்மானிக்க டிஎன்ஏ தொழில்நுட்ப முறைகள் பயன்படுத்தப்படுகின்றன, இது சில வகையான பரம்பரை நோயியலின் தோற்றத்திற்கு காரணமாகிறது. ஒரு மரபணு டிஎன்ஏவின் ஒரு பகுதியாகும், மேலும் மரபணு மாற்றம் என்பது டிஎன்ஏவின் முதன்மை கட்டமைப்பிற்கு சேதம் விளைவிப்பதால் (பிறழ்வு என்பது டிஎன்ஏ வரிசையில் ஏற்படும் அனைத்து மாற்றங்களாகப் புரிந்து கொள்ளப்படுகிறது, அவற்றின் உள்ளூர்மயமாக்கல் மற்றும் ஒரு தனிநபரின் நம்பகத்தன்மையின் மீதான தாக்கத்தைப் பொருட்படுத்தாமல்), பின்னர், ஒரு பரம்பரை நோயால் பாதிக்கப்பட்ட நோயாளியின் மெட்டாஃபேஸ் குரோமோசோம்களின் தயாரிப்புகளை ஆராய்வதன் மூலம், நோயியல் மரபணுவின் உள்ளூர்மயமாக்கலை நிறுவ முடியும். மூலக்கூறு மரபணு முறைகள் மாற்றப்பட்ட டிஎன்ஏ கட்டமைப்பின் மட்டத்தில் நோய்களைக் கண்டறிவதற்கான வாய்ப்புகளை உருவாக்குகின்றன, அவை பரம்பரை கோளாறுகளின் உள்ளூர்மயமாக்கலைத் தீர்மானிக்க அனுமதிக்கின்றன. மூலக்கூறு மரபணு முறைகள் ஒரு ஒற்றை அடித்தளத்தை கூட மாற்றுவதோடு தொடர்புடைய பிறழ்வுகளை அடையாளம் காண முடியும்.
மரபணு அடையாளத்தின் மிக முக்கியமான கட்டம் அதன் தனிமைப்படுத்தல் ஆகும். எந்த வகையான திசுக்கள் மற்றும் கருக்களைக் கொண்ட செல்களிலிருந்தும் டிஎன்ஏவை தனிமைப்படுத்தலாம். டிஎன்ஏ தனிமைப்படுத்தலின் நிலைகளில் பின்வருவன அடங்கும்: செல்களின் விரைவான சிதைவு, மையவிலக்கு மூலம் செல்லுலார் உறுப்புகள் மற்றும் சவ்வுகளின் துண்டுகளை அகற்றுதல், புரதங்களின் நொதி அழிவு மற்றும் பீனால் மற்றும் குளோரோஃபார்மைப் பயன்படுத்தி கரைசலில் இருந்து அவற்றைப் பிரித்தெடுத்தல், எத்தனாலில் மழைப்பொழிவு மூலம் டிஎன்ஏ மூலக்கூறுகளின் செறிவு.
மரபணு ஆய்வகங்களில், டிஎன்ஏ பெரும்பாலும் இரத்த லிகோசைட்டுகளிலிருந்து தனிமைப்படுத்தப்படுகிறது, இதற்காக நோயாளியிடமிருந்து 5-20 மில்லி சிரை இரத்தம் ஒரு ஆன்டிகோகுலண்ட் கரைசலுடன் (ஹெப்பரின்) ஒரு மலட்டு சோதனைக் குழாயில் எடுக்கப்படுகிறது. பின்னர் லிகோசைட்டுகள் பிரிக்கப்பட்டு மேலே உள்ள படிகளின்படி செயலாக்கப்படுகின்றன.
ஆராய்ச்சிக்கான பொருளைத் தயாரிப்பதற்கான அடுத்த கட்டம், கண்டிப்பாக குறிப்பிட்ட அடிப்படை வரிசையைக் கொண்ட பகுதிகளில் டிஎன்ஏவை துண்டுகளாக "வெட்டுவது" ஆகும், இது பாக்டீரியா நொதிகளைப் பயன்படுத்தி மேற்கொள்ளப்படுகிறது - கட்டுப்பாடு எண்டோனியூக்ளியேஸ்கள் (கட்டுப்பாடு நொதிகள்). கட்டுப்பாட்டு நொதிகள் இரட்டை இழைகள் கொண்ட டிஎன்ஏ மூலக்கூறில் 4-6, குறைவாக அடிக்கடி 8-12 நியூக்ளியோடைடுகளின் குறிப்பிட்ட வரிசைகளை அங்கீகரித்து, இந்த வரிசைகளின் இடங்களில் துண்டுகளாகப் பிரிக்கின்றன, அவை கட்டுப்பாடு தளங்கள் என்று அழைக்கப்படுகின்றன. டிஎன்ஏவின் விளைவாக வரும் கட்டுப்பாடு துண்டுகளின் எண்ணிக்கை கட்டுப்பாடு தளங்களின் நிகழ்வின் அதிர்வெண்ணால் தீர்மானிக்கப்படுகிறது, மேலும் துண்டுகளின் அளவு அசல் டிஎன்ஏ மூலக்கூறின் நீளத்தில் இந்த தளங்களின் விநியோகத்தின் தன்மையால் தீர்மானிக்கப்படுகிறது. பெரும்பாலும் கட்டுப்பாடு தளங்கள் அமைந்துள்ளன, கட்டுப்பாடுக்குப் பிறகு டிஎன்ஏ துண்டுகள் குறைவாக இருக்கும். தற்போது, பாக்டீரியா தோற்றத்தின் 500 க்கும் மேற்பட்ட வெவ்வேறு வகையான கட்டுப்பாடு நொதிகள் அறியப்படுகின்றன, மேலும் இந்த நொதிகள் ஒவ்வொன்றும் அதன் சொந்த குறிப்பிட்ட நியூக்ளியோடைடு வரிசையை அங்கீகரிக்கின்றன. எதிர்காலத்தில், கட்டுப்பாடு தளங்களை டிஎன்ஏவின் மரபணு குறிப்பான்களாகப் பயன்படுத்தலாம். கட்டுப்பாட்டின் விளைவாக உருவாகும் டி.என்.ஏ துண்டுகளை அகரோஸ் அல்லது பாலிஅக்ரிலாமைடு ஜெல்லில் எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் மூலம் நீளத்தால் வரிசைப்படுத்தலாம், இதனால் அவற்றின் மூலக்கூறு எடையை தீர்மானிக்க முடியும். பொதுவாக, ஒரு ஜெல்லில் உள்ள டி.என்.ஏ குறிப்பிட்ட சாயமிடுதல் (பொதுவாக எத்திடியம் புரோமைடு) மற்றும் கடத்தப்பட்ட புற ஊதா ஒளியில் ஜெல்லைப் பார்ப்பதன் மூலம் அடையாளம் காணப்படுகிறது. டி.என்.ஏ உள்ளூர்மயமாக்கலின் தளங்கள் சிவப்பு நிறத்தில் இருக்கும். இருப்பினும், மனிதர்களில், டி.என்.ஏ பல கட்டுப்பாட்டு நொதிகளால் செயலாக்கப்படும்போது, வெவ்வேறு நீளங்களைக் கொண்ட பல துண்டுகள் உருவாகின்றன, அவை எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் மூலம் பிரிக்க முடியாது, அதாவது எலக்ட்ரோபோரேசிஸில் தனிப்பட்ட டி.என்.ஏ துண்டுகளை பார்வைக்கு அடையாளம் காண முடியாது (ஜெல்லின் முழு நீளத்திலும் சீரான சாயம் பெறப்படுகிறது). எனவே, அத்தகைய ஜெல்லில் விரும்பிய டி.என்.ஏ துண்டுகளை அடையாளம் காண, லேபிளிடப்பட்ட டி.என்.ஏ ஆய்வுகள் கொண்ட கலப்பின முறை பயன்படுத்தப்படுகிறது.
டி.என்.ஏ அல்லது ஆர்.என்.ஏவின் எந்தவொரு ஒற்றை-இழை பிரிவும் ஒரு நிரப்பு இழையுடன் பிணைக்கும் (கலப்பினமாக்க) திறன் கொண்டது, குவானைன் எப்போதும் சைட்டோசினுடனும், அடினைன் தைமினுடனும் பிணைக்கப்படுகிறது. இரட்டை-இழை மூலக்கூறு இப்படித்தான் உருவாகிறது. குளோன் செய்யப்பட்ட மரபணுவின் ஒற்றை-இழை நகல் கதிரியக்க லேபிளுடன் பெயரிடப்பட்டால், ஒரு ஆய்வு பெறப்படுகிறது. ஆய்வு டி.என்.ஏவின் நிரப்பு பிரிவைக் கண்டுபிடிக்கும் திறன் கொண்டது, இது ஆட்டோரேடியோகிராஃபி மூலம் எளிதாக அடையாளம் காணப்படுகிறது. நீட்டிக்கப்பட்ட குரோமோசோம்களின் தயாரிப்பில் சேர்க்கப்படும் கதிரியக்க ஆய்வு மரபணுவை ஒரு குறிப்பிட்ட குரோமோசோமில் உள்ளூர்மயமாக்க அனுமதிக்கிறது: டி.என்.ஏ ஆய்வைப் பயன்படுத்தி, தெற்கு ப்ளாட்டிங்கின் போது குறிப்பிட்ட பகுதிகளை அடையாளம் காண முடியும். சோதிக்கப்படும் டி.என்.ஏ பிரிவில் ஒரு சாதாரண மரபணு இருந்தால் கலப்பினமாக்கல் ஏற்படுகிறது. ஒரு அசாதாரண நியூக்ளியோடைடு வரிசை இருந்தால், அதாவது தொடர்புடைய குரோமோசோம் கட்டமைப்புகள் ஒரு பிறழ்ந்த மரபணுவைக் கொண்டிருந்தால், கலப்பினமாக்கல் ஏற்படாது, இது நோயியல் மரபணுவின் உள்ளூர்மயமாக்கலை தீர்மானிக்க அனுமதிக்கிறது.
டிஎன்ஏ ஆய்வுகளைப் பெற, மரபணு குளோனிங் முறை பயன்படுத்தப்படுகிறது. இந்த முறையின் சாராம்சம் என்னவென்றால், ஒரு மரபணு அல்லது மரபணுவின் ஒரு பகுதியுடன் தொடர்புடைய டிஎன்ஏ துண்டு ஒரு குளோனிங் துகளில் செருகப்படுகிறது, பொதுவாக ஒரு பாக்டீரியா பிளாஸ்மிட் (பாக்டீரியா செல்களில் இருக்கும் மற்றும் ஆண்டிபயாடிக் எதிர்ப்பு மரபணுக்களைக் கொண்டிருக்கும் வளைய எக்ஸ்ட்ராக்ரோமோசோமல் டிஎன்ஏ), பின்னர் செருகப்பட்ட மனித மரபணுவுடன் பிளாஸ்மிட் கொண்ட பாக்டீரியாக்கள் பெருக்கப்படுகின்றன. பிளாஸ்மிட்டில் உள்ள தொகுப்பு செயல்முறைகளுக்கு நன்றி, மனித மரபணு அல்லது அதன் பிரிவின் பில்லியன் கணக்கான நகல்களைப் பெறலாம்.
இதன் விளைவாக வரும் டி.என்.ஏ பிரதிகள், கதிரியக்க லேபிள் அல்லது ஃப்ளோரோக்ரோம்களால் பெயரிடப்பட்டு, பின்னர் ஆய்வு செய்யப்பட்ட டி.என்.ஏ மூலக்கூறுகளின் தொகுப்பில் நிரப்பு வரிசைகளைத் தேட ஆய்வுகளாகப் பயன்படுத்தப்படுகின்றன.
தற்போது, மரபணு பிறழ்வுகளைக் கண்டறிய டிஎன்ஏ ஆய்வுகளைப் பயன்படுத்தி பல வகையான முறைகள் உள்ளன.
[